Genetic transformation of Escherichia coli cells with different degrees of competence with R-plasmids / T. V. Sklyar [и др.] // Вісн. пробл. біол. і медицини = Bulletin of Problems in Biology and Medicine : український науково-практичний журнал. - 2024. - № 1(172). - С. 371-375. - 379 . - ISSN 2077-4214 MeSH-~главная: ТРАНСФОРМАЦИЯ ГЕНЕТИЧЕСКАЯ -- TRANSFORMATION, GENETIC ЛЕКАРСТВЕННАЯ УСТОЙЧИВОСТЬ У МИКРООРГАНИЗМОВ -- DRUG RESISTANCE, MICROBIAL КЛЕТКИ -- CELLS ESCHERICHIA COLI -- ESCHERICHIA COLI Анотація: У даній роботі досліджено перенос R-плазмід в ході трансформації у бактерій. Здатність до переносу детермінант резистентності є важливим фактором для набуття селективних переваг окремими клітинами в популяції мікроорганізмів. Проблема збільшення кількості та інтенсивності циркуляції антибіотикорезистентних мікроорганізмів обумовлена плазмідами, які передаються з високою частотою в популяціях мікроорганізмів в результаті генетичної трансформації. Метою роботи було проведення порівняльного аналізу частоти трансформації клітин Escherichia coli різного ступеню компетентності плазмідами з детермінантами стійкості до антибіотиків. Методи досліджень: мікробіологічні, генетичні, біометричні. Результати. Здатність до трансформації визначається ступенем компетентності мікробних клітин. Існує багато видів бактерій, у яких відсутня природна компетентність або її прояв знаходиться на низькому рівні, але вони також можуть бути трансформовані під дією певних фізичних та хімічних індукторів. Тому було запропоновано провести порівняльний аналіз частоти трансформації клітин Escherichia coli штамів XL1-Blue та 906 різного ступеню компетентності плазмідами з детермінантами стійкості до антибіотиків: pSBbi-RN (RN) з геном стійкості до ампіциліну та mCherry-Mito-7 (mCherry) з геном стійкості до канаміцину. Була проведена оцінка частоти трансформації клітин E. coli штамів XL1-Blue та 906 плазмідами MCherry та RN. Виявлено, що для компетентних клітин E. coli XL1-Blue частота трансформації складала відповідно 3×102 КУО/мкг ДНК та 2,5×102 КУО/ мкг ДНК, а для штаму E. coli 906 — 2,8×102 КУО/мкг ДНК та 2×102 КУО/мкг ДНК. Ефективність трансформації плазмідами некомпетентних клітин досліджуваних штамів E. coli дорівнювала 0. Cуперкомпетентні клітини отримані методом Іноу виявили високу ефективність трансформації, яка складала (1-2)×105 КУО/мкг ДНК для E. coli XL1-Blue та (1-15)×105 КУО/мкг ДНК для E. coli 906. Отримані дані з електрофорезу в агарозному гелі свідчать про успішний перенос плазмід під час трансформації. Перейти к внешнему ресурсу Текст Дод.точки доступу: Sklyar, T. V. Bohatova, O. D. Gavryliuk, V. G. Lavrentieva, K. V. Kurahina, N. V. Примірників всього: 1 ЧЗ (1) Вільні: ЧЗ (1) |